一、背景介紹
在人源抗體開發(fā)的諸多技術(shù)中，天然全人源抗體庫技術(shù)以其高通量、高效率和靶點通用性的優(yōu)點被越來越多的用到抗體先導(dǎo)分子開發(fā)中。一個高品質(zhì)的人源抗體庫需要解決庫容量、多樣性、插入率和包裝效率等諸多問題，才能獲得更高的篩選成功率和擁有良好生物活性的抗體候選分子。
二、開發(fā)流程
全人源噬菌體展示scFv抗體庫是通過將人源抗體的可變區(qū)基因VH、VL和VK，輕重鏈通過拼接成scFv，scFv通過分子克隆重組到pCOMB3系列噬菌粒載體上，與M13噬菌體的PIII蛋白融合表達，在大腸桿菌內(nèi)通過噬菌體復(fù)制增殖結(jié)合到噬菌體表面，形成噬菌體-基因-抗體唯一配對的噬菌體展示復(fù)合顆粒形式。
人源scFv庫構(gòu)建流程
針對靶點蛋白篩選時，通過多輪抗原-抗體結(jié)合與洗脫富集，使特異性針對靶點蛋白的噬菌體展示復(fù)合顆粒富集，再通過ELISA等方式篩選出陽性單克隆菌株，便可通過測序得到針對靶點蛋白的抗體可變區(qū)序列。
三、RenyuBio 天然全人源抗體庫優(yōu)勢
四、全人源抗體IgG開發(fā)流程
